Laboratorio De Biologia Grupo Sanguineo 2k6y4g
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LABORATORIO N° 8 BIOLOGIA MOLECULAR GRUPO SANGUINEO
INDICE I.
INTRODUCCION ......................................................................................................1
II. OBJETIVOS ................................................................................................................5 III.
MATERIALES Y METODOS..............................................................................5
IV.
PROCEDIMIENTO: ..............................................................................................6
V. DISCUSIONES ........................................................................................................ 13 VI.
CONCLUSIONES................................................................................................ 13
VII. BIBLIOGRAFIA. ................................................................................................. 14 VIII. CUESTIONARIO ................................................................................................ 15
GRUPO SANGUINEO: SISTEMA ABO Y FACTOR Rh
I. INTRODUCCION Los grupos sanguíneos humanos ocupan un lugar especial en la genética, en primer lugar por sus contribuciones al establecimiento de algunos principios genéticos y luego por su importancia clínica en la transfusión de sangre en obstetricia. Antígenos del sistema ABO Los antígenos del sistema ABO se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta y sexta semana del embrión y no se desarrollan completamente hasta después del nacimiento. Esta podría ser una razón para que la enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido por incompatibilidad ABO, sea usualmente leve. Durante el crecimiento, se van adicionando los azúcares terminales sobre la cadena de oligosacáridos en la membrana de los eritrocitos, dando origen a cada uno de los antígenos de forma específica. Entre los 2 y 4 años de edad, los antígenos A y B están completamente desarrollados y permanecen constantes durante toda la vida. Genética: hay tres genes que controlan la expresión de los antígenos ABO. El gen H, ubicado en el cromosoma 19, codifica para la producción de una enzima transferasa (transferasa H), que une una molécula de L-fucosa a la galactosa terminal (Gal) de un precursor común (sustancia precursora) unido a los lípidos o proteínas de membrana del eritrocito, dando origen al antígeno H, el cual es el paso anterior en la formación de los antígenos de los grupos sanguíneos ABO. Los individuos que son homocigóticos para el gen nulo (h/h) no producen antígeno H y desarrollan anticuerpos anti-H; por lo tanto, estas personas aparte de no producir el antígeno H, tampoco producen los antígenos A o B, y su suero contiene anti-A, anti-B y anti-H. Este fenotipo se conoce como el fenotipo Bombay.
LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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Desarrollo de los antígenos del sistema ABO.
El gen ABO, ubicado en el cromosoma 9, posee tres alelos que son el A, el B y el O, que varían de acuerdo a las sustituciones de nucleótidos, las cuales determinan las especificidades de las enzimas para las cuales codifican. El alelo A codifica para la enzima transferasa A que cataliza la adición de un residuo de N-acetilgalactosamina (GalNAc) al antígeno H, generándose así el antígeno A. El alelo B codifica para la enzima transferasa B que cataliza la adición de un residuo de D-galactosa (Gal) al antígeno H, generándose el antígeno B. El alelo O sólo difiere del alelo A en la deleción de un nucleótido (guanina G en la posición 261), lo que tiene como consecuencia un cambio en el marco de lectura o frameshift y la producción de una proteína sin actividad de transferasa . La figura 2 ilustra la síntesis de los antígenos ABO. El gen Se, ubicado también en el cromosoma 19, codifica para una enzima (fucosiltransferasa) que se expresa en el epitelio de tejidos secretores, incluidas las glándulas salivares y los tractos respiratorio y gastrointestinal. Esta enzima cataliza la producción de antígeno H en secreciones del organismo; así, los individuos “secretores” poseen al menos una copia del gen Se (Se/Se o Se/se) que codifica para una enzima funcional, produciendo antígeno H en las secreciones, el cual a su vez es
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procesado como antígeno A y/o B, dependiendo del genotipo ABO del individuo. Por su parte, los individuos “no secretores” son homocigóticos para el gen nulo (se/se) y por lo tanto no pueden producir la forma soluble del antígeno H.
Expresión de los genes ABO. Convenciones: Fuc: L–fucosa; Gal: D–galactosa; GalNAc: N– acetilgalactosamina.
CARACTERÍSTICAS DEL SISTEMA ABO Las personas con sangre del tipo A tienen glóbulos rojos que expresan antígenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antígenos B en el plasma de su sangre. Las personas con sangre del tipo B tiene la combinación contraria, glóbulos rojos con antígenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antígenos A en el plasma de su sangre. Los individuos con sangre del tipo O ó 0 (cero) no expresan ninguno de los dos antígenos (A o B) en la superficie de sus glóbulos rojos pero tienen anticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB expresan ambos antígenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos. LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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Esta clasificación internacional, debida a Landsteiner, ha reemplazado a la de Moss, en la cual el grupo I corresponde al grupo AB de la precedente, el grupo 2 al grupo A, el grupo 3 al grupo B, y el grupo 4 al grupo O. Estos cuatro grupos sanguíneos constituyen el sistema ABO. A causa de estas combinaciones, el tipo 0 puede transfundir a cualquier persona con cualquier tipo y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.
FACTOR RH El factor Rh es una proteína integral de la membrana aglutinógena de los glóbulos rojos. Son Rh positivas aquellas personas que presenten dicha proteína en sus eritrocitos y Rh negativa quienes no presenten la proteína. Un 85% de la población tiene en esa proteína una estructura dominante, que corresponde a una determinada secuencia de aminoácidos que en lenguaje común son denominados habitualmente Rh+. Alrededor de la sexta semana de gestación, el antígeno Rh comienza a ser expresado en los glóbulos rojos humanos. Tener Rh– [erre hache negativo] significa que se tiene la misma proteína pero con modificaciones en ciertos aminoácidos que determinan diferencias significativas en la superficie de los glóbulos rojos, y hacen a los humanos Rh– disponer de anticuerpos (aglutininas) en el plasma que reaccionan contra los glóbulos rojos Rh+ [erre hache positivo]. El principal antígeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de antígeno D es el anti-D. Si el antígeno D está presente el fenotipo es Rh positivo y si D está ausente es Rh negativo. Se han identificado más de 45 antígenos del sistema Rh, pero de todos ellos apenas cinco son frecuentes, estos son: D, C, E, c, e. Los anticuerpos a los distintos antígenos Rh aparecen después de exponerse un individuo Rh negativo a eritrocitos de sangre Rh positivo. La herencia de los antígenos Rh es determinada por un complejo de dos genes, de los cuales uno codifica la proteína transportadora de antígeno D y otro codifica la proteína transportadora de antígeno "C" o "c", o de "E" y "e". Las personas LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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Rh positivas poseen genes RHD, que codifica la proteína transportadora de antígeno D y RHCE, que codifica la especificidad de la proteína transportadora de C y E. Mientras el Rh negativo tiene únicamente el gen RHCE. El 45% de los individuos Rh positivos es homocigoto al factor D, y el 55% restante es heterocigoto por haber heredado un factor D positivo y otro negativo de sus progenitores. La transfusión de sangre de un Rh+ a un Rh– que no tiene dicho aglutinógeno induce la formación de anticuerpos, que en sucesivas donaciones puede aglutinar la sangre (formar coágulos). De ahí que en las donaciones de sangre y órganos se tenga en cuenta dicho factor.
II. OBJETIVOS Entender la clasificación de los grupos sanguíneos humanos de acuerdo al sistema ABO. Determinar el grupo sanguíneo de los estudiantes.
III. MATERIALES Y METODOS Placas de microtubulacion Mondadientes Algodón, alcohol y lancetas Suero anti-A Suero anti-B Suero anti-AB Suero anti-D
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IV. PROCEDIMIENTO: TIPO DE SANGRE “A” 1.- Se limpia el dedo índice con algodón y alcohol.
2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estéril.
3. se deja caer una gota en la placa de microtubulacion.
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Se agrega una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
4. Mezclar con mondadientes de manera independiente.
SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO
Se observa que glóbulos sanguíneos presenta una aglutinación donde se colocó el anticuerpo B por lo tanto la sangre es de tipo – A
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TIPO DE SANGRE “O” 1.- Se limpia el dedo índice con algodón y alcohol. 2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estéril.
3. se deja caer una gota en los 3 pocillos
4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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Se agrega una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
Mezclar con mondadientes de manera independiente.
SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO
Se observa una aglutinación en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es “O”
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TIPO DE SANGRE Y FACTOR Rh 1.- Se limpia el dedo índice con algodón y alcohol. 2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estéril.
3. se deja caer una gota en los 3 pocillos
4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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Anti - B
Anti- A
Anti - D
Factor Rh
El principal antígeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de antígeno D es el anti-D. Si el antígeno D está presente el fenotipo es Rh positivo y si D está ausente es Rh negativo
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Mezclar con mondadientes de manera independiente.
SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO
Leer los pocillos y determine el grupo sanguíneo y el factor Rh a cada paciente.
Se observa una aglutinación en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es “O” Con el anti D se observa que no hay formación de aglutinaciones lo que indica que es un Rh +
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V. DISCUSIONES Se identificó la presencia de antígenos en los eritrocitos, utilizando reactivos compuestos de anticuerpos conocidos como anti A anti B y anti D. La prueba para la clasificación sanguínea de rutina se basa en una técnica de hemaglutinación, se utilizan reactivos comerciales que contienen anticuerpos específicos para cada antígeno, que se mezclan con la sangre a clasificar. Después de mezclar una gota del reactivo con una gota de sangre, se observa la presencia de hemaglutinación.
VI. CONCLUSIONES Se entendió la clasificación de los grupos sanguíneos humanos de acuerdo al sistema ABO. Al realizar las reacciones de hemaglutinación en los glóbulos rojos se determinó el grupo sanguíneo de los estudiantes obteniéndose: sangre de tipo – “A”, y sangre de tipo “O”. Del mismo modo se obtuvo el factor Rh, dando como resultado Rh (+).
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VII. BIBLIOGRAFIA. 1. García CAA. medigraphic. [Online].; 2009 [cited 2014 diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl2009/myl097-8c.pdf" http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl2009/myl097-8c.pdf . 2. UNLP. amazonasws. [Online].; 2010 [cited 2014 diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://ecaths1.s3.amazonaws.com/hematologiaclinicafacena/477720561.TP% 206.doc" http://ecaths1.s3.amazonaws.com/hematologiaclinicafacena/477720561.TP%2 06.doc . 3. enciclopedia de salud dietetica y psicologia. [Online].; 2014 [cited 2014 diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.enciclopediasalud.com/" http://www.enciclopediasalud.com/ . 4. S.L.U. EIT. Medicina molecular FIBAO. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://medmol.es/quienes_somos.cfm" http://medmol.es/quienes_somos.cfm . 5. Definicion abc. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php" http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php . 6. Diaz Y. slideshare. [Online].; 2012 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupossanguineos" http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupossanguineos . 7. Lau LGFM. farmaciaulat. [Online].; 2011 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-yfactor-rh.html" http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-factorrh.html .
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VIII. CUESTIONARIO 1. ¿QUÉ ES UN ANTÍGENO Y QUE ES UN ANTICUERPO? Antígeno Un antígeno es una molécula capaz de producir una respuesta del sistema inmune adaptativo mediante la activación de linfocitos. Esta definición amplía el concepto de antígeno más allá del concepto clásico que definía antígeno como la sustancia que desencadena la producción de anticuerpos. Así dentro de esta definición de antígeno se incluyen las moléculas que, previa presentación antigénica, son capaces de desencadenar la activación de células T citotóxicas capaces de destruir las células diana sin la participación de anticuerpos. La mayoría de los antígenos son de naturaleza peptídica, aunque también pueden actuar como antígenos moléculas de distintos tipos como lipopolisacáridos e incluso ADN. Los antígenos pueden ser moléculas enteras pero generalmente son el resultado del procesamiento por células presentadoras de antígenos. A las regiones específicas de los antígenos que son reconocidas por los anticuerpos o por los receptores de células T (TCRs) se les conoce como epítopos o determinantes antigénicos. Los anticuerpos reconocen epítopos conformacionales que deben ser accesibles en la proteína original. Los TCR reconocen la estructura que adopta un antígeno, ya procesado, dentro de la binding-groove de las moléculas MHC. En el proceso de presentación antigénica las células presentadoras de antígeno procesan y presentan tanto proteínas propias como extrañas a las células T. A los péptidos propios que son reconocidos como extraños por el sistema inmune se les llama autoantígenos. La respuesta descontrolada frente a autoantígenos puede ocasionar procesos patológicos. Anticuerpo Un anticuerpo es una glucoproteína o una proteína unida a uno o varios hidratos de carbono que se puede encontrar en forma soluble en la sangre o en algún otro fluido corporal de los seres vivos vertebrados. La razón de ser o función más importante que despliega un anticuerpo en el cuerpo es que son la principal LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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herramienta con la que cuenta el sistema inmunitario para defenderse y neutralizar la acción de algún elemento extraño que ingresa en el, como puede ser el caso de una bacteria, un parásito o cualquier virus. Si bien por supuesto puede haber variaciones, el anticuerpo típico está formado por unidades estructurales básicas, ostentando cada una de estas de dos cadenas pesadas y dos ligeras más pequeñas. Asimismo, los anticuerpos también despliegan y tiene una importante participación en la medicina en lo inherente al diagnóstico de las enfermedades, ya que a través de una prueba conocida como prueba serológica, los profesionales médicos pueden determinar si hay anticuerpos presentes y si por el contrario, luego del test se comprueba que los mismos no están, entonces, ahí si se podrá confirmar fehacientemente que la persona no se encuentra infectada. 2. ¿CUÁL ES EL FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE TITULACIÓN EMPLEADA EN EL RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUÍNEOS?
Los glóbulos rojos del paciente se ponen en o con Reactivo Anti-A, Anti-B o Anti-A, B monoclonal. Si existen en la superficie de los eritrocitos los antígenos correspondientes, se producirá una aglutinación visible macroscópicamente. La ausencia de aglutinación en todos los casos, implica grupo O. Los glóbulos rojos del paciente se ponen en o con suero anti-D (anti-Rho). Si existe en la superficie del eritrocito el antígeno correspondiente, se producirá una aglutinación visible macroscópicamente. La presencia del antígeno D se determina enfrentando los hematíes problema, en un medio proteico alto, con suero anti-D (RHo). La aglutinación o no aglutinación de los hematíes ensayados, son indicativos de la presencia o ausencia del correspondiente antígeno en los mismos.
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La variante Du, forma débil del antígeno D, puede detectarse mejor incubando la suspensión de hematíes con suero anti-D, efectuando la prueba de la antiglobulina. 3. ¿CUÁL ES LA DIFERENCIA ENTRE EL ANTÍGENO A, EL ANTÍGENO B Y EL FACTOR RH? Estos grupos sanguíneos están determinados
por diferencias en los
monosacáridos terminales expuestos en los globósidos de la membrana de las células, los que corresponden a antígenos que en el laboratorio se detectan mediante reacciones de hemaglutinación en glóbulos rojos. En el grupo sanguíneo A se expone una N-acetilgalactosamina, en el grupo B una galactosa, en el grupo AB se exponen ambas, N- acetilgalactosamina y galactosa, mientras que en el grupo O no se expone ninguna de estas. Dependiendo de estos antígenos el cuerpo desarrolla anticuerpos contra el antígeno no expuesto, por ejemplo, las personas que expongan solo el antígeno A desarrollarán anticuerpos contra el antígeno B, y visceversa. Las personas de grupo AB no desarrollan ningún anticuerpo, mientras que los del grupo O desarrollan anticuerpos tanto para el antígeno A como el B. La presencia de antígenos y anticuerpos determina la compatibilidad entre donantes sanguíneos y sus receptores. Respecto al sistema Rhesus (Rh), las personas pueden ser Rh positivo o Rh negativo, lo cual también está implicado en la compatibilidad sanguínea entre donantes receptores.
El antígeno Rh implicado en este sistema también se
denomina antígeno D. A diferencia del sistema ABO, cuya herencia es de tipo codominante, en el sistema Rhesus el Rh (+) es de tipo dominante y el Rh (-) es recesivo. Esto puede generar la eritroblasto fetal debido a "incompatibilidad Rh" la cual es una afección que se desarrolla cuando una mujer embarazada tiene sangre Rh (-) y el bebé que lleva en su vientre tiene sangre Rh (+) heredado del papá.
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4. ¿CUÁL ES EL FENOTIPO BOMBAY? El fenotipo Bombay clásico (Oh) se caracteriza por la ausencia de los antígenos A, B y H tanto sobre los eritrocitos como en las secreciones, debido a la herencia de dos genes hh en el locusH; por lo tanto, la síntesis de los antígenos A y B está bloqueada por la ausencia del antígeno H necesario para su expresión. En otras palabras, para que se produzca antígeno H, debe existir al menos una copia funcional del gen H (H/H o H/h); si ambas copias del gen son inactivas (h/h) se produce el fenotipo Bombay. Debido a que estas personas son deficientes en los antígenos A, B y H, ellos producen anti-H, anti-A y anti-B de origen natural. En las pruebas iniciales los eritrocitos Bombay se clasifican como grupo O. Los eritrocitos no reaccionan con anti-A, anti-B ni anti-AB, mientras que el suero reacciona con células A, B, AB y O. Por lo tanto, las personas con el fenotipo Bombay deben ser transfundidas sólo con eritrocitos de fenotipo Bombay. La ausencia de los antígenos ABH en este fenotipo no está asociada con defectos de membrana o cambios en la vida media de los eritrocitos. La presencia de los anticuerpos en el suero hace muy difícil la transfusión sanguínea, ya que todos los eritrocitos, excepto aquellos de otro fenotipo Bombay, son incompatibles. La frecuencia del fenotipo Bombay clásico es de 1 en 13.000 en India, y raramente se encuentra en otras poblaciones.
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INDICE I.
INTRODUCCION ......................................................................................................1
II. OBJETIVOS ................................................................................................................5 III.
MATERIALES Y METODOS..............................................................................5
IV.
PROCEDIMIENTO: ..............................................................................................6
V. DISCUSIONES ........................................................................................................ 13 VI.
CONCLUSIONES................................................................................................ 13
VII. BIBLIOGRAFIA. ................................................................................................. 14 VIII. CUESTIONARIO ................................................................................................ 15
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I. INTRODUCCION Los grupos sanguíneos humanos ocupan un lugar especial en la genética, en primer lugar por sus contribuciones al establecimiento de algunos principios genéticos y luego por su importancia clínica en la transfusión de sangre en obstetricia. Antígenos del sistema ABO Los antígenos del sistema ABO se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta y sexta semana del embrión y no se desarrollan completamente hasta después del nacimiento. Esta podría ser una razón para que la enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido por incompatibilidad ABO, sea usualmente leve. Durante el crecimiento, se van adicionando los azúcares terminales sobre la cadena de oligosacáridos en la membrana de los eritrocitos, dando origen a cada uno de los antígenos de forma específica. Entre los 2 y 4 años de edad, los antígenos A y B están completamente desarrollados y permanecen constantes durante toda la vida. Genética: hay tres genes que controlan la expresión de los antígenos ABO. El gen H, ubicado en el cromosoma 19, codifica para la producción de una enzima transferasa (transferasa H), que une una molécula de L-fucosa a la galactosa terminal (Gal) de un precursor común (sustancia precursora) unido a los lípidos o proteínas de membrana del eritrocito, dando origen al antígeno H, el cual es el paso anterior en la formación de los antígenos de los grupos sanguíneos ABO. Los individuos que son homocigóticos para el gen nulo (h/h) no producen antígeno H y desarrollan anticuerpos anti-H; por lo tanto, estas personas aparte de no producir el antígeno H, tampoco producen los antígenos A o B, y su suero contiene anti-A, anti-B y anti-H. Este fenotipo se conoce como el fenotipo Bombay.
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Desarrollo de los antígenos del sistema ABO.
El gen ABO, ubicado en el cromosoma 9, posee tres alelos que son el A, el B y el O, que varían de acuerdo a las sustituciones de nucleótidos, las cuales determinan las especificidades de las enzimas para las cuales codifican. El alelo A codifica para la enzima transferasa A que cataliza la adición de un residuo de N-acetilgalactosamina (GalNAc) al antígeno H, generándose así el antígeno A. El alelo B codifica para la enzima transferasa B que cataliza la adición de un residuo de D-galactosa (Gal) al antígeno H, generándose el antígeno B. El alelo O sólo difiere del alelo A en la deleción de un nucleótido (guanina G en la posición 261), lo que tiene como consecuencia un cambio en el marco de lectura o frameshift y la producción de una proteína sin actividad de transferasa . La figura 2 ilustra la síntesis de los antígenos ABO. El gen Se, ubicado también en el cromosoma 19, codifica para una enzima (fucosiltransferasa) que se expresa en el epitelio de tejidos secretores, incluidas las glándulas salivares y los tractos respiratorio y gastrointestinal. Esta enzima cataliza la producción de antígeno H en secreciones del organismo; así, los individuos “secretores” poseen al menos una copia del gen Se (Se/Se o Se/se) que codifica para una enzima funcional, produciendo antígeno H en las secreciones, el cual a su vez es
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procesado como antígeno A y/o B, dependiendo del genotipo ABO del individuo. Por su parte, los individuos “no secretores” son homocigóticos para el gen nulo (se/se) y por lo tanto no pueden producir la forma soluble del antígeno H.
Expresión de los genes ABO. Convenciones: Fuc: L–fucosa; Gal: D–galactosa; GalNAc: N– acetilgalactosamina.
CARACTERÍSTICAS DEL SISTEMA ABO Las personas con sangre del tipo A tienen glóbulos rojos que expresan antígenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antígenos B en el plasma de su sangre. Las personas con sangre del tipo B tiene la combinación contraria, glóbulos rojos con antígenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antígenos A en el plasma de su sangre. Los individuos con sangre del tipo O ó 0 (cero) no expresan ninguno de los dos antígenos (A o B) en la superficie de sus glóbulos rojos pero tienen anticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB expresan ambos antígenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos. LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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Esta clasificación internacional, debida a Landsteiner, ha reemplazado a la de Moss, en la cual el grupo I corresponde al grupo AB de la precedente, el grupo 2 al grupo A, el grupo 3 al grupo B, y el grupo 4 al grupo O. Estos cuatro grupos sanguíneos constituyen el sistema ABO. A causa de estas combinaciones, el tipo 0 puede transfundir a cualquier persona con cualquier tipo y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.
FACTOR RH El factor Rh es una proteína integral de la membrana aglutinógena de los glóbulos rojos. Son Rh positivas aquellas personas que presenten dicha proteína en sus eritrocitos y Rh negativa quienes no presenten la proteína. Un 85% de la población tiene en esa proteína una estructura dominante, que corresponde a una determinada secuencia de aminoácidos que en lenguaje común son denominados habitualmente Rh+. Alrededor de la sexta semana de gestación, el antígeno Rh comienza a ser expresado en los glóbulos rojos humanos. Tener Rh– [erre hache negativo] significa que se tiene la misma proteína pero con modificaciones en ciertos aminoácidos que determinan diferencias significativas en la superficie de los glóbulos rojos, y hacen a los humanos Rh– disponer de anticuerpos (aglutininas) en el plasma que reaccionan contra los glóbulos rojos Rh+ [erre hache positivo]. El principal antígeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de antígeno D es el anti-D. Si el antígeno D está presente el fenotipo es Rh positivo y si D está ausente es Rh negativo. Se han identificado más de 45 antígenos del sistema Rh, pero de todos ellos apenas cinco son frecuentes, estos son: D, C, E, c, e. Los anticuerpos a los distintos antígenos Rh aparecen después de exponerse un individuo Rh negativo a eritrocitos de sangre Rh positivo. La herencia de los antígenos Rh es determinada por un complejo de dos genes, de los cuales uno codifica la proteína transportadora de antígeno D y otro codifica la proteína transportadora de antígeno "C" o "c", o de "E" y "e". Las personas LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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Rh positivas poseen genes RHD, que codifica la proteína transportadora de antígeno D y RHCE, que codifica la especificidad de la proteína transportadora de C y E. Mientras el Rh negativo tiene únicamente el gen RHCE. El 45% de los individuos Rh positivos es homocigoto al factor D, y el 55% restante es heterocigoto por haber heredado un factor D positivo y otro negativo de sus progenitores. La transfusión de sangre de un Rh+ a un Rh– que no tiene dicho aglutinógeno induce la formación de anticuerpos, que en sucesivas donaciones puede aglutinar la sangre (formar coágulos). De ahí que en las donaciones de sangre y órganos se tenga en cuenta dicho factor.
II. OBJETIVOS Entender la clasificación de los grupos sanguíneos humanos de acuerdo al sistema ABO. Determinar el grupo sanguíneo de los estudiantes.
III. MATERIALES Y METODOS Placas de microtubulacion Mondadientes Algodón, alcohol y lancetas Suero anti-A Suero anti-B Suero anti-AB Suero anti-D
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IV. PROCEDIMIENTO: TIPO DE SANGRE “A” 1.- Se limpia el dedo índice con algodón y alcohol.
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3. se deja caer una gota en la placa de microtubulacion.
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3. se deja caer una gota en los 3 pocillos
4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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3. se deja caer una gota en los 3 pocillos
4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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GRUPO SANGUINEO: SISTEMA ABO Y FACTOR Rh
Anti - B
Anti- A
Anti - D
Factor Rh
El principal antígeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de antígeno D es el anti-D. Si el antígeno D está presente el fenotipo es Rh positivo y si D está ausente es Rh negativo
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Mezclar con mondadientes de manera independiente.
SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO
Leer los pocillos y determine el grupo sanguíneo y el factor Rh a cada paciente.
Se observa una aglutinación en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es “O” Con el anti D se observa que no hay formación de aglutinaciones lo que indica que es un Rh +
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V. DISCUSIONES Se identificó la presencia de antígenos en los eritrocitos, utilizando reactivos compuestos de anticuerpos conocidos como anti A anti B y anti D. La prueba para la clasificación sanguínea de rutina se basa en una técnica de hemaglutinación, se utilizan reactivos comerciales que contienen anticuerpos específicos para cada antígeno, que se mezclan con la sangre a clasificar. Después de mezclar una gota del reactivo con una gota de sangre, se observa la presencia de hemaglutinación.
VI. CONCLUSIONES Se entendió la clasificación de los grupos sanguíneos humanos de acuerdo al sistema ABO. Al realizar las reacciones de hemaglutinación en los glóbulos rojos se determinó el grupo sanguíneo de los estudiantes obteniéndose: sangre de tipo – “A”, y sangre de tipo “O”. Del mismo modo se obtuvo el factor Rh, dando como resultado Rh (+).
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VII. BIBLIOGRAFIA. 1. García CAA. medigraphic. [Online].; 2009 [cited 2014 diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl2009/myl097-8c.pdf" http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl2009/myl097-8c.pdf . 2. UNLP. amazonasws. [Online].; 2010 [cited 2014 diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://ecaths1.s3.amazonaws.com/hematologiaclinicafacena/477720561.TP% 206.doc" http://ecaths1.s3.amazonaws.com/hematologiaclinicafacena/477720561.TP%2 06.doc . 3. enciclopedia de salud dietetica y psicologia. [Online].; 2014 [cited 2014 diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.enciclopediasalud.com/" http://www.enciclopediasalud.com/ . 4. S.L.U. EIT. Medicina molecular FIBAO. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://medmol.es/quienes_somos.cfm" http://medmol.es/quienes_somos.cfm . 5. Definicion abc. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php" http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php . 6. Diaz Y. slideshare. [Online].; 2012 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupossanguineos" http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupossanguineos . 7. Lau LGFM. farmaciaulat. [Online].; 2011 [cited 2014 Diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-yfactor-rh.html" http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-factorrh.html .
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VIII. CUESTIONARIO 1. ¿QUÉ ES UN ANTÍGENO Y QUE ES UN ANTICUERPO? Antígeno Un antígeno es una molécula capaz de producir una respuesta del sistema inmune adaptativo mediante la activación de linfocitos. Esta definición amplía el concepto de antígeno más allá del concepto clásico que definía antígeno como la sustancia que desencadena la producción de anticuerpos. Así dentro de esta definición de antígeno se incluyen las moléculas que, previa presentación antigénica, son capaces de desencadenar la activación de células T citotóxicas capaces de destruir las células diana sin la participación de anticuerpos. La mayoría de los antígenos son de naturaleza peptídica, aunque también pueden actuar como antígenos moléculas de distintos tipos como lipopolisacáridos e incluso ADN. Los antígenos pueden ser moléculas enteras pero generalmente son el resultado del procesamiento por células presentadoras de antígenos. A las regiones específicas de los antígenos que son reconocidas por los anticuerpos o por los receptores de células T (TCRs) se les conoce como epítopos o determinantes antigénicos. Los anticuerpos reconocen epítopos conformacionales que deben ser accesibles en la proteína original. Los TCR reconocen la estructura que adopta un antígeno, ya procesado, dentro de la binding-groove de las moléculas MHC. En el proceso de presentación antigénica las células presentadoras de antígeno procesan y presentan tanto proteínas propias como extrañas a las células T. A los péptidos propios que son reconocidos como extraños por el sistema inmune se les llama autoantígenos. La respuesta descontrolada frente a autoantígenos puede ocasionar procesos patológicos. Anticuerpo Un anticuerpo es una glucoproteína o una proteína unida a uno o varios hidratos de carbono que se puede encontrar en forma soluble en la sangre o en algún otro fluido corporal de los seres vivos vertebrados. La razón de ser o función más importante que despliega un anticuerpo en el cuerpo es que son la principal LABORATORIO DE BILOGÍA MOLECULAR
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herramienta con la que cuenta el sistema inmunitario para defenderse y neutralizar la acción de algún elemento extraño que ingresa en el, como puede ser el caso de una bacteria, un parásito o cualquier virus. Si bien por supuesto puede haber variaciones, el anticuerpo típico está formado por unidades estructurales básicas, ostentando cada una de estas de dos cadenas pesadas y dos ligeras más pequeñas. Asimismo, los anticuerpos también despliegan y tiene una importante participación en la medicina en lo inherente al diagnóstico de las enfermedades, ya que a través de una prueba conocida como prueba serológica, los profesionales médicos pueden determinar si hay anticuerpos presentes y si por el contrario, luego del test se comprueba que los mismos no están, entonces, ahí si se podrá confirmar fehacientemente que la persona no se encuentra infectada. 2. ¿CUÁL ES EL FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE TITULACIÓN EMPLEADA EN EL RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUÍNEOS?
Los glóbulos rojos del paciente se ponen en o con Reactivo Anti-A, Anti-B o Anti-A, B monoclonal. Si existen en la superficie de los eritrocitos los antígenos correspondientes, se producirá una aglutinación visible macroscópicamente. La ausencia de aglutinación en todos los casos, implica grupo O. Los glóbulos rojos del paciente se ponen en o con suero anti-D (anti-Rho). Si existe en la superficie del eritrocito el antígeno correspondiente, se producirá una aglutinación visible macroscópicamente. La presencia del antígeno D se determina enfrentando los hematíes problema, en un medio proteico alto, con suero anti-D (RHo). La aglutinación o no aglutinación de los hematíes ensayados, son indicativos de la presencia o ausencia del correspondiente antígeno en los mismos.
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La variante Du, forma débil del antígeno D, puede detectarse mejor incubando la suspensión de hematíes con suero anti-D, efectuando la prueba de la antiglobulina. 3. ¿CUÁL ES LA DIFERENCIA ENTRE EL ANTÍGENO A, EL ANTÍGENO B Y EL FACTOR RH? Estos grupos sanguíneos están determinados
por diferencias en los
monosacáridos terminales expuestos en los globósidos de la membrana de las células, los que corresponden a antígenos que en el laboratorio se detectan mediante reacciones de hemaglutinación en glóbulos rojos. En el grupo sanguíneo A se expone una N-acetilgalactosamina, en el grupo B una galactosa, en el grupo AB se exponen ambas, N- acetilgalactosamina y galactosa, mientras que en el grupo O no se expone ninguna de estas. Dependiendo de estos antígenos el cuerpo desarrolla anticuerpos contra el antígeno no expuesto, por ejemplo, las personas que expongan solo el antígeno A desarrollarán anticuerpos contra el antígeno B, y visceversa. Las personas de grupo AB no desarrollan ningún anticuerpo, mientras que los del grupo O desarrollan anticuerpos tanto para el antígeno A como el B. La presencia de antígenos y anticuerpos determina la compatibilidad entre donantes sanguíneos y sus receptores. Respecto al sistema Rhesus (Rh), las personas pueden ser Rh positivo o Rh negativo, lo cual también está implicado en la compatibilidad sanguínea entre donantes receptores.
El antígeno Rh implicado en este sistema también se
denomina antígeno D. A diferencia del sistema ABO, cuya herencia es de tipo codominante, en el sistema Rhesus el Rh (+) es de tipo dominante y el Rh (-) es recesivo. Esto puede generar la eritroblasto fetal debido a "incompatibilidad Rh" la cual es una afección que se desarrolla cuando una mujer embarazada tiene sangre Rh (-) y el bebé que lleva en su vientre tiene sangre Rh (+) heredado del papá.
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4. ¿CUÁL ES EL FENOTIPO BOMBAY? El fenotipo Bombay clásico (Oh) se caracteriza por la ausencia de los antígenos A, B y H tanto sobre los eritrocitos como en las secreciones, debido a la herencia de dos genes hh en el locusH; por lo tanto, la síntesis de los antígenos A y B está bloqueada por la ausencia del antígeno H necesario para su expresión. En otras palabras, para que se produzca antígeno H, debe existir al menos una copia funcional del gen H (H/H o H/h); si ambas copias del gen son inactivas (h/h) se produce el fenotipo Bombay. Debido a que estas personas son deficientes en los antígenos A, B y H, ellos producen anti-H, anti-A y anti-B de origen natural. En las pruebas iniciales los eritrocitos Bombay se clasifican como grupo O. Los eritrocitos no reaccionan con anti-A, anti-B ni anti-AB, mientras que el suero reacciona con células A, B, AB y O. Por lo tanto, las personas con el fenotipo Bombay deben ser transfundidas sólo con eritrocitos de fenotipo Bombay. La ausencia de los antígenos ABH en este fenotipo no está asociada con defectos de membrana o cambios en la vida media de los eritrocitos. La presencia de los anticuerpos en el suero hace muy difícil la transfusión sanguínea, ya que todos los eritrocitos, excepto aquellos de otro fenotipo Bombay, son incompatibles. La frecuencia del fenotipo Bombay clásico es de 1 en 13.000 en India, y raramente se encuentra en otras poblaciones.
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