Recuento De Leucocitos ed6m

RECUENTO DE LEUCOCITOS

RESUMEN En la práctica se llevó a cabo el conteo de leucocitos mediante el uso de la técnica recuento diferencial de leucocitos, este análisis tiene gran importancia en el campo médico en la determinación de algunas enfermedades como apendicitis.

INTRODUCCIÓN Esta prueba está incluida en los exámenes generales de salud y ayudan a investigar una variedad de enfermedades. Un recuento elevado de leucocitos produce en infección, alergia, enfermedad sistémica, inflamación, daño tisular, y la leucemia. Un bajo conteo de leucocitos puede ocurrir en algunas infecciones virales, inmunodeficiencia y fallo de médula ósea. El recuento de leucocitos ofrece pistas sobre ciertas enfermedades y ayuda a los médicos a monitorear la recuperación de un paciente. Conteos anormales que vuelven a la normalidad indican que la afección está mejorando, mientras que los valores que se vuelven más anormales indican que la condición está empeorando. El diferencial revelará qué tipo de leucocitos son los más afectados. Por ejemplo, un recuento elevado con un aumento absoluto de linfocitos que tienen un aspecto atípico es más a menudo causado por la mononucleosis infecciosa. El diferencial de leucocitos también identificará principios que pueden ser reactivos (por ejemplo, una respuesta a la infección aguda) o el resultado de una leucemia.

OBJETIVOS Realizar el análisis de recuento de leucocitos a una muestra de sangre de un estudiante del laboratorio. Conocer el método de recuento mediante el uso de la cámara Neubauer.

MATERIALES Pipeta para recuento de glóbulos blancos Microscopio óptico

Cámara de recuento globular: Se emplea la cámara con cuadriculado perfeccionado de Neubauer. El área del cuadriculado mide 9 mm2. El cuadro central se emplea para contar los hematíes y las plaquetas, y los cuadros de los ángulos, que miden cada uno 1 mm2 para contar los leucocitos.

REACTIVOS Se utiliza el diluyente de Turk que disuelve o lisa los eritrocitos para que no interfieran en el recuento de leucocitos. Ácido acético glacial (3%)

2.0 mL

Azul de metileno o violeta de genciana en solución acuosa

1.0 mL

Agua destilada c.s.p.

100 mL

PROCEDIMIENTO El procedimiento para la preparación de la muestra se lleva a cabo como lo descrito en la guía de laboratorio realizado por el profesor. La cámara se le coloca el cubre objetos y por capilaridad se agrega una pequeña gota que cubra ambas cámaras. Para el conteo de leucocitos se realizó con un microscopio en 10X y se llevó a cabo en la cámara Neubauer en los 8 cuadrantes, al momento de la observación se hizo la consideración de contar los leucocitos que están sobre una raya de manera a no contar el mismo dos veces en cuadrados diferentes, los localizados en las rayas superior e izquierda se consideran.

ANALISIS Y RESULTADOS El reactivo de Turk es una mezcla de ácido acético y azul de metileno que tiene como fin la hemólisis de los eritrocitos, dejando a los leucocitos intactos y coloreados con lo cual se puede realizar la observación. Los resultados obtenidos de ambas cámaras se muestran en la figura 1 Para realizar la conversión se tiene en cuenta la formula Número de leucocitos/mm3 =

Número de células contadas x dilución x 10 Número de cuadros grandes contados

Figura 1: Resultados obtenidos al realizar el recuento en la cámara Neubauer. Como se realiza el conteo en los 2 cuadrantes es decir, en 8 cuadros grandes se podría resumir la formula en multiplicar por 25 el resultado de la suma de los leucocitos encontrados en ambos cuadrantes, así encontramos la cantidad de leucocitos por mm3. El resultado obtenido de la suma de ambos cuadrantes es de 289 por tanto:

289 X 25 = 7225 leucocitos por mm3 de sangre. Si observamos la tabla 1 su valor se encuentra en los valores correspondientes para una edad de 21 años que es la edad en la que oscila el estudiante al que se le ha realizado el análisis. CIFRA NORMAL l Al momento de nacimiento

18000 x mm3 promedio

12 horas

22800 x mm3 promedio

24 horas

18900 x mm3 promedio

1 mes

10800 x mm3 promedio

1 año

11400 x mm3 promedio

12 años

8000 x mm3 promedio

21 años

7500 x mm3 promedio

Tabla 1: Cifras normales de la cantidad de leucocitos por mm3 según la edad

COMPLEMENTARIO

Los leucocitos son una familia de células sanguíneas protectoras del sistema inmune, ejerciendo funciones muy diferentes. Morfológicamente se pueden dividir de la siguiente manera: 1 GRANULOCITOS Los granulocitos constituyen una gran proporción de leucocitos y desempeñan un papel fundamental en la primera línea de defensa inmune, especialmente en la lucha contra bacterias y hongos. Recientemente se han desarrollado técnicas que permiten obtener los concentrados de granulocitos, que demostraron ser útiles en determinadas circunstancias clínicas. Los granulocitos se obtienen generalmente a partir de sangre de un solo donante por citaferesis, que es un método mecánico esencialmente que requiere el uso de un aparato de alta tecnología y cateterización de la vena de tamaño grande o mediano. Cada unidad contiene más de 10.000 millones de granulocitos y cantidades variables de otras células sanguíneas, incluyendo linfocitos, plaquetas y glóbulos rojos. El volumen de cada unidad varía entre 200-400 ml. Los concentrados de granulocitos se debe n almacenar a una temperatura de 20-24 ° C y se istra dentro de las 24 horas después de la cosecha. 1,1 Los neutrófilos Los neutrófilos son un tipo de leucocitos, circulan en el torrente sanguíneo por los en menos de un día y luego salen hacia el espacio intersticial, donde permanecen durante 2-3 días. Son capaces de defender el cuerpo humano contra las bacterias, ya sea por fagocitosis o por exocitosis. Se dividen en: 1.1.1 Granulocitos juveniles 1.1.2 Granulocitos polimorfonucleares. 1.1.3 Granulocitos segmentados 1.3 Basófilos Los basófilos son un tipo de leucocito, el menos abundante. Tiene núcleo irregular, difícil de ver por la granulación basófila que lo cubre casi siempre. Tamaño semejante al de los segmentados. Se denomina basófilo a cualquier célula que se tiñe fácilmente con colorantes básicos (hematoxilina principalmente). Sin embargo, cuando se emplea este

término sin ninguna aclaración adicional, suele referirse a uno de los tipos de leucocitos (glóbulos blancos de la sangre) de la familia de los granulocitos. 1.4 Eosinófilos Un eosinófilo es un leucocito de tipo granulocito pequeño derivado de la médula ósea, que tiene una vida media en la circulación sanguínea de 3 a 4 días antes de migrar a los tejidos en donde permanecen durante varios días. Su desarrollo en la médula ósea es estimulado por diversas interleucinas, como la IL-5, la IL-3 y el factor estimulante de colonias granulocito-macrófago. Es característico su núcleo bilobulado, al igual que sus distintivos gránulos citoplásmicos. Estas proteínas granulares son responsables de muchas funciones proinflamatorias, principalmente en la patogénesis de las enfermedades alérgicas, como célula efectora de hipersensibilidad inmediata, así como en la muerte de parásitos. Una de las enzimas más importantes que contienen sus gránulos es la histaminasa, que se encarga de hidrolizar la histamina, regulando así la respuesta alérgica.

2. LOS LINFOCITOS Los linfocitos son un subconjunto de los leucocitos .Su tarea principal es la defensa específica contra sustancias extrañas, sobre todo de agentes infecciosos. Su actividad también está dirigida hacia el cambio de las células propias del cuerpo como las células tumorales. 2,1 Los linfocitos B (células B) Los linfocitos B son los leucocitos de los cuales depende la inmunidad mediada por anticuerpos con actividad específica de fijación de antígenos. Las células B, que constituyen un 5 a 15% del total de linfocitos, dan origen a las células plasmáticas que producen anticuerpos. Los linfocitos son de dos tipos principales, atendiendo a su origen y función: células T, que se diferencian inicialmente en el timo, y las células B, que se diferencian en el hígado y bazo fetal, y en la médula ósea del adulto (la 'B' proviene del latín Bursa fabricii, el órgano en el cual se desarrollan los linfocitos B en las aves). Durante su desarrollo, los linfocitos T y B adquieren receptores específicos para antígenos, el de las células B se le conoce como Receptor de linfocito B (BCR). 2,2 Los linfocitos T (células T) Los linfocitos T o células T pertenecen al grupo de leucocitos que son conocidos como linfocitos. Estas células tienen núcleos de forma ovoide que ocupan la mayoría del espacio intracelular.

Los linfocitos T son los responsables de coordinar la respuesta inmune celular constituyendo el 70% del total de los linfocitos que segregan proteínas o citoquinas. También se ocupan de realizar la cooperación para desarrollar todas las formas de respuestas inmunes, como la producción de anticuerpos por los linfocitos B. Se diferencian de los linfocitos B y de las células asesinas (natural killer o NK) por poseer un receptor especial en la superficie de la membrana, el Receptor de linfocitos T (denominado TCR por T cell receptor). Sin embargo, en un frotis microscópico de sangre no es posible distinguir uno de otro a simple vista. La denominación de estos linfocitos como "T" se debe a que su maduración tiene lugar en el timo (órgano linfoide que constituye uno de los controles centrales del sistema inmunitario del organismo). El número de leucocitos en sangre periférica en un humano promedio es de 4 a 11 x 10 9 por litro, del cual, normalmente, un 20% son linfocitos. Las células asesinas naturales (células NK).

3. LOS MONOCITOS Los monocitos son un tipo de glóbulos blancos agranulocitos. Es el leucocito de mayor tamaño, su tamaño es de 18 μm, y representa del 4 al 8% de los leucocitos en la sangre. Como características destacables, presenta un núcleo en general arriñonado, lobulado o cerebriforme, que se tiñe irregularmente en forma de "rejilla" o reticular de color violetaazulado. Usualmente el núcleo guarda una proporción de 2:1 en área con respecto al citoplasma que lo rodea, y muy frecuentemente presenta una depresión profunda. El citoplasma es abundante y de color gris azulado pudiendo estar acompañado de vacuolas blanquecinas. Los monocitos se generan en la médula ósea y después viajan por la sangre, para luego emigrar a diferentes tejidos como hígado, bazo, pulmones, ganglios linfáticos, huesos, cavidades serosas, etc. Después de alrededor de 24 horas de permanecer en el torrente sanguíneo, los monocitos lo abandonan y atraviesan el endotelio de los capilares o las vénulas poscapilares hacia el tejido conectivo, donde se diferencian rápidamente a macrófagos. Su principal función es la de fagocitar, es decir, comerse a diferentes microorganismos o restos celulares. Para fagocitar se tienen en cuenta diversos factores como la presencia de antígenos. No obstante, el procedimiento es sencillo, y consiste en rodear con los pseudópodos la molécula, acción que es inhibida en los casos en que el macrófago reconoce a la célula como integrante de un tejido propio del organismo, por medio de las proteínas del CMH (complejo mayor de histocompatibilidad) presentes sobre las membranas celulares.

CONCLUSIONES 

Para la práctica realizada se encontró que la estudiante a la cual se le realizó el análisis se encuentra en condiciones normales en cuanto al contenido de leucocitos en sangre ya que los resultados obtenidos al compararse con la tabla 1 de valores normales se encuentra muy cercano a lo correspondiente a la edad de 21 años que es la edad en la que oscila la persona.

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El azul de metileno presente en el reactivo de Turk es necesario para poder teñir los leucocitos y su posterior observación, su principio es el de teñir los ácidos presentes en el núcleo, por esto los eritrocitos no se tiñen ya que no poseen núcleo, además, debido al ácido acético que es el otro componente del reactivo de Turk, produce la hemolisis de los eritrocitos más no la de los leucocitos.

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La aplicación del recuento en cámara de Neubauer también puede aplicarse a otros campos más del tipo biológico como en el caso del seguimiento del incremento de una población de células y/o diferentes microorganismos.

BIBLIOGRAFÍA

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USO DEL HEMOGRAMA LINEAL PARA EL RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS EN EL HOSPITAL REGIONAL HONORIO DELGADO, Carlos Bonifacio Suclly Barriga Arequipa, diciembre 1993 - junio 1994

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ATLAS DE HEMATOLOGÍA CLÍNICA 3O ED Jacqueline H. Carr,Bernadette F. Rodak Editorial Panamericana 2009 pgs 7_10

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MANUAL DE PRÁCTICAS PARA BIOLOGIA CELULAR Gerardo Andres Torres Rodríguez Práctica 3 RECUENTO DE LEUCOCITOS, Popayán, Noviembre de 2002 pgs 17-22

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La fuente http://es.wikipedia.org se utilizó para los términos basófilo, eosinófilo, linfocito B, linfocito T, monocito.

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http://leucocitosaltos.blogspot.com/2013/01/definicion-y-tipos-de-leucocitos.html