Manitol Salado Agar O Chapman 32e4p

Bernal Mercado Alexis Uriel 6FM2

Manitol Salado Agar o Chapman Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos, productos cosméticos y otros materiales de importancia sanitaria. También, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halófilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar.

Fundamento Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura. Las colonias sospechosas, se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa. En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales. El manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompañante, y el rojo fenol es el indicador de pH (7.4 ± 0.2). Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol. Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color. Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.

Fórmula (g/L) Extracto de carne Pluripeptona d-Manitol Cloruro de Sodio Agar Rojo de fenol

Instrucciones 1.0 Suspender 111 g de polvo por litro de 10.0 agua destilada. Reposar 5 minutos y 10.0 mezclar calentando a ebullición durante 1 75.0 o 2 minutos. Distribuir y esterilizar en 15.0 autoclave a 118-121°C durante 15 0.002 minutos. 5 pH final: 7.4 ± 0.2

Bernal Mercado Alexis Uriel 6FM2

Siembra Sembrar en superficie un inóculo denso de la muestra.

Incubación De rutina: durante 18-24 horas a 35-37 °C, en aerobiosis. La American Public Health Association (A.P.H.A) recomienda la incubación durante 3 días a 32 °C, en aerobiosis.

Resultados Microorganismos

Crecimiento

Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Escherichia coli Klebsiella pneumoniae

Excelente Bueno Inhibido Inhibido

Características del medio Medio preparado: rojo

Almacenamiento  

Medio deshidratado: a 10-35 ºC. Medio preparado: a 2-8 ºC.

Características de las colonias