Aislamiento Y Caracterización Espectrofotométrica Y Cromatografía En Capa Fina Del Dna 1o5p6z

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL Escuela Nacional de Ciencias Biológicas AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA Y CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA DEL DNA Casillas Ramos Guillermo Arturo, Orta Camargo Berenice 3FV2 SECCION 2 Objetivo: -Aislar, purificar y caracterizar DNA del germen de guayaba. -Realización de la cromatografía en capa fina del DNA

Resultados: Tabla 1. DATOS DELA ESPECTROMETRÍA.

Longitud de onda (nm) 200 205 210 215 220 225 230 235 240 245 250 255 260 265 270 275 280 285 290 295 300

Absorbancia 0 0 0 3.00 0.847 0 0.021 1.051 0.234 0 0.160 0.016 0 0 0.001 0 0 0 0. 0. 0.

Absorbancia 4 3 2 1 0

Grafica 1. ABSORBANCIA VS LONGITUD DE ONDA

Imagen 2.CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA. Tabla 2. RESULTADOS DE LA CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

Muestra Adenina Citosina Guanina Uracilo Timina RNA

DNA

Rf 0.4375 0.3544 0.3717 0.5696 0.6282 citosina guanina adenina uracilo citosina guanina adenina timina

0.3205 0.4102 0.4871 0.5769 0.3376 0.3896 0.4805 0.6233

Discusiones: Se realizó el experimento de aislamiento de DNA de guayaba el cual se realizó de manera correcta ya el DNA se enrollo de manera muy fácil y rápida en la varilla de vidrio. Debido a los resultados obtenidos en la prueba de espectrometría no es posible calcular el porcentaje de pureza del DNA ni su concentración en g/mL esto se debe a que utilizamos otro DNA que no fue el nuestro por lo tanto no sabemos si su aislamiento o purificación fue el adecuado para esta prueba, sin

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL Escuela Nacional de Ciencias Biológicas embargo se realizó la gráfica de absorbancia vs Conclusiones: longitud de onda la cual no tiene gran parecido a la reportada en la literatura esto de igual modo puede ser por que el DNA utilizado no fue aislado de la manera correcta y contenga otras sustancias, que provoca que la luz ultravioleta del espectrofotómetro incide de manera diferente y nos proporcione datos erróneos. Se realizó un cromatograma con las bases nitrogenadas del DNA y del RNA: citosina, guanina, adenina, uracilo y timina, aparte de poner una muestra de DNA y RNA para así poder demostrar que estos ácidos nucleicos contienen estas bases nitrogenadas, al revelar el cromatograma con una lámpara de rayos UV se observaron unas manchas respectivamente de las cuales se pudo observar que el RNA contiene, uracilo, citosina, adenina y guanina, mientras que el DNA contiene timina, citosina, adenina y guanina. Al trabajar con estas bases nitrogenadas podemos saber que existes dos tipos: las puricas y las pirimidicas, en las puricas encontramos la adenina y la guanina mientras que en las bases nitrogenadas pirimidicas se encuentra la timina, citosina y uracilo.

-Se comprobó que el no realizar de manera correcta el aislamiento y purificación del DNA puede afectar en los resultados de la prueba del espectrofotómetro. -Se realizó la comprobación de las bases nitrogenadas que contiene el DNA y RNA mediante la revelación de una cromatografía en capa fina.

Bibliografía: -Thomas M. Devlin, 2004,”bioquímica: libro de texto con aplicaciones medicas” 4ª edición, editorial Revertè S. A., pp: 193 -Peña A, 2004 “Bioquímica”, editorial Limusa Mexico, pp: 151